 Termocyklery | Termocyklery
Reakcja łańcuchowa polimerazy, PCR (ang. Polymerase Chain Reaction) – łańcuchowa reakcja polimerazy, metoda powielania łańcuchów DNA w warunkach laboratoryjnych, polegająca na sekwencji wielokrotnego podgrzewania i oziębiania próbki. PCR znajduje wiele zastosowań, m.in. w badaniach nad genomem, charakterystyce ekspresji genów, klonowaniu genów, diagnostyce klinicznej, identyfikacji osób zaginionych, kryminalistyce, paleontologii.
Reakcja PCR składa się z wielokrotnie powtarzanego cyklu trzech etapów, które zachodzą w rożnych temperaturach. Można zatem wymuszać je bez ingerencji w skład mieszaniny, a jedynie przez zmianę temperatury mieszaniny reakcyjnej.
Denaturacja. Pierwszym etapem jest rozplecenie podwójnej helisy matrycowego DNA (lub mRNA, jeśli stanowi matrycę). W wysokiej temperaturze (zwykle około 95°C) pękają wiązania wodorowe i podwójna helisa DNA rozdziela się na dwa pojedyncze łańcuchy. W celu uzyskania tego efektu podnosi się temperaturę mieszaniny reakcyjnej do wymaganych 95° na 15 sekund.
Annealing - hybrydyzacja odcinków starterowych. Polega na tworzeniu odcinków dwuniciowych, składających się z przygotowanych starterów - cząsteczek DNA komplementarnych do sekwencji DNA oskrzydlających gen mający ulec namnożeniu - z matrycową cząsteczką DNA. Etap ten zachodzi w temperaturze niższej, ściśle określonej dla danej pary starterów (pomiędzy 45-60°C), przyłączają się one do matrycy. Ponieważ roztwory primerów są dodawane w dużym nadmiarze w stosunku do matrycy, jest bardzo mało prawdopodobne, żeby na tym etapie, zamiast hybryd starter-matryca utworzyły się hybrydy połączonych się ze sobą dwóch nici matrycy.
Elongacja - Na tym etapie zachodzi właściwa synteza DNA i tym samym amplifikacja pożądanego genu. Podwyższenie temperatury do około 72°C powoduje utworzenie się na matrycy, z przyłączonymi do niej starterami, kompleksu z polimerazą DNA, wskutek czego rozpoczyna się synteza nici komplementarnej do matrycy. Reakcja ta trwa zwykle 30 sekund.
Następnie cykl powtarza się i w kolejnym etapie annealingu i elongacji jako matryca mogą służyć wszystkie zsyntetyzowane dotychczas cząsteczki genu. W ten sposób reakcja, dopóki substraty i enzym są w wystarczającej ilości, zachodzi coraz szybciej, powodując coraz większy przyrost kopii genu na etapie elongacji.
Gdyby wydajność metody była stuprocentowa, po n cyklach reakcji z jednej cząsteczki można by uzyskać 2n cząsteczek. W praktyce wydajność procesu jest mniejsza, co nie zmienia faktu, że metoda PCR pozwala na geometryczne zwielokrotnienie pożądanego łańcucha DNA.
Kliknij tutaj, pytaj nas o więcej informacji np. o ofertę
| Termocykler bez gradientu Swift Mini Pro | |
| |
Dane techniczne
| Typ urządzenia |
SWT-MIP-0,2 |
SWT-MIP-0,5 |
Pojemność bloku |
24 x 0,2ml |
18 x 0,5ml |
Stosowane probówki |
0,2ml, 3 x 8 strips, mikropłytka 24 miejscowa |
probówki 0,5ml |
Maksymalna szybkość grzania |
5,0°C/sec |
4,0°C/sec |
Maksymalna szybkość chłodzenia |
4,0°C/sec |
3,0°C/sec |
| Jednorodność temp. bloku |
±0,3°C |
| Dokładność temp. bloku |
±0,3°C |
| Sposób sterowania temp. |
blokiem lub probówką |
| Zakres temp. |
4°C do 99°C |
| Temp. pokrywy |
30°C … 110°C |
| Ilość protokołów |
100 |
| Rodzaj wyświetlacza |
Graficzny LCD |
| Zasilanie |
230V 50Hz |
| Wymiary |
212 x 297 x 200 mm |
| Waga |
3.2 kg |
| Złącze PC |
RS232 |
|
|
| Termocykler z gradientem Swift Maxi Pro | |
| |
Dane techniczne
Typ bloku |
SWT-MXP-BLC1 |
SWT-MXP-BLC2 |
SWT-MXP-BLC3 |
SWT-MXP-BLC4 |
SWT-MXP-BLC5 |
Pojemność |
96 × 0.2ml |
48 × 0.2ml + 30×0.5ml |
384 dołkowa mikropłytka |
48 × 0.2ml + 48×0.2ml |
4 szkiełka in situ |
Gradient |
Tak |
Nie |
Tak |
Nie |
Nie |
Stosowane probówki |
0.2ml
96-dołkowe płytki
12 x 8 strips
8 x 12 strips |
0,2 ml
0,5 ml
4 x 12 strips |
384-dołkowa mikropytka |
0,2ml
6 x 8 strips |
4 szkiełka in situ |
Zakres temperatury |
4°C ~ 99°C |
Maksymalna szybkość grzania |
4.0°C/sec |
2.8°C/sec |
2.8°C/sec |
4.0°C/sec |
1.8°C/sec |
Maksymalna szybkość chłodzenia |
4.0°C/sec |
2.8°C/sec |
2.8°C/sec |
4.0°C/sec |
1.8°C/sec |
Jednorodność temp. bloku |
+0.2°C |
Dokładność temp. bloku |
+0.2°C |
Max. Gradient |
30°C |
- |
30°C |
- |
- |
Min. Gradient |
1°C |
- |
1°C |
- |
- |
Temp. pokrywy |
30°C ~ 110°C |
Sposób sterowania temp. |
blokiem lub probówką |
Rodzaj wyświetlacza |
5.7" Graficzny LCD |
Pojemność protokołów |
100 protokołów w wewnętrznej pamięci; nieograniczona ilość przy użyciu pamięci „Menory Stiuk lub PC poprzez USB (opcjonalnie chronione hasłem) |
PC Interface |
RJ45 |
Wymiary (szer. x gł. x wys.) |
306 × 386 × 295 mm |
|
|
|
| |
|
|
Termocykler bez gradientu Swift Mini Pro)
)
